Leopoldo Santos Argumedo.
Investigador Titular.
Doctor en Ciencias, Inmunología (1989). Escuela Nacional de Ciencias Biológicas, IPN (México).
Categoría en el SNI: Nivel II
Temas de investigación: Biología del Linfocito B, Inmunodeficiencias primarias humanas,
Inmunidad e Infección.
El proceso de maduración
y de activación de los linfocitos se acompaña de cambios en la expresión de
moléculas de su superficie. Dichos cambios permiten la identificación de
estados discretos de maduración, pero también dan cuenta del posible papel
funcional de dichas moléculas. Una de las herramientas más útiles para la
identificación de moléculas ha sido el uso de los anticuerpos monoclonales, ya que
algunos de estos reactivos permiten el reconocimiento de determinantes
antigénicos únicos en las moléculas de interés. Los anticuerpos monoclonales
son una herramienta invaluable ya que además de su fina especificidad mantienen
la reproducibilidad del reconocimiento entre un lote y otro. Algunos de estos
anticuerpos tienen la ventaja adicional de funcionar como agonistas o
antagonistas, permitiendo el estudio de algunas de las funciones biológicas que
llevan a cabo las moléculas que son reconocidas por ellos. Gracias a estas herramientas en mi
laboratorio estamos analizando la expresión y la función de diversas moléculas
de la superficie de los linfocitos B del ratón. Las dos moléculas mas
estudiadas por mi laboratorio son: CD38 y CD44. CD38 es una ecto-enzima
que también tiene funciones de receptor. Como receptor, CD38 esta implicado en
los eventos de maduración tanto de linfocitos B como T, así como durante la
activación y la diferenciación a células plasmáticas de los linfocitos B. El
entrecruzamiento de esta molécula produce un efecto dual, dependiendo del
estado de madurez de las células. Así por ejemplo, mientras que la población
que los linfocitos B del bazo más inmadura muere por apoptosis, la
población mas madura prolifera y se
diferencia. Las vías de señalización implicadas en este proceso se comparten
(aunque no totalmente) con el receptor para el antígeno de dichos linfocitos.
En cuanto a CD44, mi laboratorio ha reportado que su entrecruzamiento en
linfocitos B maduros activados induce cambios dinámicos en su morfología.
Dichos cambios son consecuencia de modificaciones substanciales en el citoesqueleto de la célula. En mi laboratorio hemos
analizado la participación de la actina y la tubulina en dicho proceso, y ahora nos hemos enfocado al
análisis de las miosinas no musculares. Estos estudios nos permiten vislumbrar
algunas de las funciones celulares de los linfocitos y nos permiten especular
de su posible papel en algunas enfermedades en las que participa el sistema
inmunológico.
Igualmente importante,
en estos últimos años hemos incursionado al estudio de las inmunodeficiencias
humanas, concentrando nuestros esfuerzos, en una primera etapa, en los defectos
de la inmunidad humoral. En esta línea de investigación el laboratorio ha
contribuido con la descripción de algunas mutaciones no descritas en el gene de
la BTK, una cinasa de tirosina implicada en la
señalización del receptor para el antígeno de los linfocitos B. Actualmente
estamos analizando el efecto funcional de dichas mutaciones en un sistema de
linfocitos de pollo, tratando de correlacionar la mutación con cambios
estructurales y funcionales en dicha enzima. Finalmente, también hemos ampliado
el estudio de los defectos de la inmunidad humoral, al incluir paciente con
defectos en CD40 y su ligando, así como paciente con inmunodeficiencia común
variable. Con estos estudios esperamos contribuir a un mejor conocimiento de
estas enfermedades, aportar algunas herramientas de diagnóstico molecular y
finalmente, en un futuro, dichos estudios podrían sugerir rutas para un posible
tratamiento.
Algunos métodos comúnmente empleados en el laboratorio son: la producción y caracterización de anticuerpos
monoclonales, la citofluorometría, los cultivos de
líneas celulares y de células primarias, el análisis de algunos mecanismos de
señalización tales como el flujo de calcio, la fosforilación de proteínas, y
finalmente los ensayos de activación, proliferación y apoptosis de los linfocitos.
Integrantes del
laboratorio:
Héctor Romero Ramírez
(auxiliar de investigación) Berrón Ruíz
(estudiante de doctorado) José Luis Maravillas Montero
(estudiante de maestría) Alexander Vargas
Hernández (estudiante de maestría) Felipe Vences Catalán
(estudiante de maestría) Gabriela Vallejo Flores
(estudiante de maestría) Ex integrantes recientes
del laboratorio: Gabriela López Herrera (posdoc en Royal Free Hospital, Londres UK) Juan Carlos Rodríguez
Alba (posdoc en UCSF, San Francisco USA) Publicaciones recientes: Linfocitos B teñidos con el anticuerpo monoclonal CD38
y con yoduro de propidio para contrastar el núcleo.
Linfocitos B preactivados con LPS e IL4 y cultivados
en placas de plástico cuya superficie fue pretratada
con un anticuerpo monoclonal contra CD44 para inducir su estiramiento (“spreading”). Las células están teñidas con faloidina y un fluorocromo rojo
para poner de manifiesto la polimerización de l.
El corte óptico muestra el contorno de las células, ¿a que se parecen?
Linfocitos B en proceso de estiramiento y
proliferación (¿o al revés?).
Miembros del laboratorio (Febrero del 2008).
